Plásmido CRISPR de Activación (h) UQCRC1: sc-404435-ACT

El gen humano **UQCRC1** codifica la **proteína central 1 de la ubiquinol-citocromo c reductasa**, un componente estructural esencial del **complejo III** (citocromo **bc1**) de la cadena respiratoria mitocondrial en la **membrana interna mitocondrial**. Al favorecer la transferencia de electrones desde el ubiquinol hacia el citocromo c y estabilizar el ensamblaje del complejo III, UQCRC1 contribuye a la **fosforilación oxidativa**, al mantenimiento del **potencial de membrana mitocondrial** y a la regulación de las **especies reactivas de oxígeno (ROS)**. La alteración de la función del complejo III puede desplazar el metabolismo energético celular, influir en la susceptibilidad a la apoptosis y modificar vías de señalización dependientes del estado redox. En la literatura, los cambios en la expresión de UQCRC1 o la disfunción del complejo III mitocondrial se han asociado con trastornos mitocondriales y con contextos patológicos más amplios caracterizados por **bioenergética comprometida** y **estrés oxidativo**.

UQCRC1 El plásmido de activación CRISPR (h) proporciona un enfoque específico y no destructivo para regular al alza la expresión endógena de UQCRC1 sin alterar la secuencia de ADN subyacente.

UQCRC1 El plásmido de activación CRISPR (h) es un sistema mediador de activación sinérgica (SAM) de tres plásmidos diseñado para la regulación al alza transcripcional altamente eficiente y específica del locus UQCRC1 en líneas celulares humanas. El sistema se basa en una Cas9 catalíticamente inactiva (dCas9) que porta dos mutaciones inactivadoras (D10A y N863A) que eliminan la actividad nucleasa al tiempo que conservan la unión al ADN. Esta dCas9 se fusiona con VP64, un potente activador transcripcional, y se coexpresa con un gen de resistencia a la blasticidina para la selección. El segundo plásmido codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1, un complejo activador secundario que actúa en conjunto con dCas9-VP64, junto con un gen de resistencia a la higromicina. El tercer plásmido codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 que reclutan el complejo MS2-p65-HSF1 al sitio de activación, acompañado de un gen de resistencia a la puromicina. Los tres plásmidos se administran en una proporción de masa de 1:1:1 para una expresión equilibrada de todos los componentes del sistema.

Una vez ensamblado en el locus diana, el complejo SAM se une aproximadamente 200 pb aguas arriba del sitio de inicio transcripcional UQCRC1, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma coordinada para reclutar la maquinaria transcripcional e impulsar la regulación al alza de la expresión endógena de UQCRC1. A diferencia de la Cas9 con actividad nucleasa, dCas9 no introduce roturas de doble cadena ni modifica la secuencia genómica, preservando el locus nativo UQCRC1 y permitiendo el estudio de las respuestas transcripcionales dependientes de UQCRC1 en el locus endógeno, lo que la convierte en una herramienta valiosa para estudios funcionales, la identificación de genes diana y la modelización de la restauración de la vía UQCRC1 en células tumorales con expresión de UQCRC1 silenciada o reducida.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.