Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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UPIIIa Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401796
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- UPIIIa El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico UPIIIa, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: UPIIIa Anticuerpo (C-6): sc-166808
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
UPIIIa Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401796 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
UPK3A codifica la uroplaquina IIIa (UPIIIa), un componente integral de membrana tipo tetraspanina de las placas de uroplaquinas que refuerzan la superficie apical de las células paraguas uroteliales diferenciadas. La UPIIIa se ensambla con otras uroplaquinas para organizar dominios de membrana especializados que sostienen la función de barrera, la diferenciación de la superficie y la resiliencia mecánica durante el llenado y el vaciado de la vejiga. A través de su papel en la polaridad epitelial y el tráfico de proteínas de membrana, UPK3A contribuye a la homeostasis urotelial y a las respuestas ante lesiones. Los patrones alterados de expresión de uroplaquinas se analizan con frecuencia como características moleculares del estado de diferenciación urotelial en estudios de patología vesical y remodelación epitelial.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO UPIIIa (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen UPK3A en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del UPK3A junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de UPK3A tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína UPIIIa.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en UPK3A para la investigación de la señalización de UPIIIa, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de UPK3A críticos para la función de UPIIIa
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de UPK3A para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido UPIIIa CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido UPIIIa CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus UPK3A. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR UPIIIa (h) y el plásmido HDR UPIIIa (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología UPK3A para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana UPK3A definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.