UGT2B5 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423603
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- UGT2B5 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico UGT2B5, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
UGT2B5 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423603 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
La UGT2B5 de ratón es una UDP‑glucuronosiltransferasa microsomal que cataliza la conjugación con ácido glucurónico de sustratos lipofílicos, aumentando su solubilidad en agua para su eliminación. Esta actividad de metabolismo de fase II favorece la depuración de xenobióticos y contribuye al control homeostático de pequeñas moléculas endógenas mediante la glucuronidación. Las enzimas de la familia UGT2B se integran en programas de desintoxicación hepáticos y extrahepáticos y pueden modular las respuestas celulares a la exposición química al regular la disponibilidad de sustratos y los perfiles de metabolitos. La capacidad alterada de glucuronidación se investiga con frecuencia en el contexto de la toxicología, la reprogramación metabólica asociada a la inflamación y la variabilidad dependiente del genotipo en el manejo de fármacos y la sensibilidad a sustancias químicas.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO UGT2B5 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Ugt2b5 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Ugt2b5 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Ugt2b5 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína UGT2B5.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Ugt2b5 para la investigación de la señalización de UGT2B5, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Ugt2b5 críticos para la función de UGT2B5
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Ugt2b5 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido UGT2B5 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido UGT2B5 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Ugt2b5. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR UGT2B5 (m) y el plásmido HDR UGT2B5 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Ugt2b5 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Ugt2b5 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.