UGT2B4 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404208

Descripción general

UGT2B4 codifica una UDP‑glucuronosiltransferasa humana que cataliza la glucuronidación de esteroides endógenos y metabolitos relacionados con los ácidos biliares, así como de diversos xenobióticos, aumentando su solubilidad para su eliminación. Esta actividad de conjugación de fase II se integra con las redes de desintoxicación hepáticas e intestinales y se conecta con vías reguladas por receptores nucleares que coordinan la homeostasis metabólica y las respuestas al estrés químico. La variación en la expresión o la actividad de UGT2B4 puede modificar el manejo de esteroides y ácidos biliares y alterar el aclaramiento de sustratos de molécula pequeña, afectando las relaciones exposición–respuesta en farmacología. En consecuencia, UGT2B4 se estudia en el contexto de fenotipos asociados al metabolismo y de diferencias tisulares en la capacidad de biotransformación.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO UGT2B4 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen UGT2B4 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del UGT2B4 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de UGT2B4 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína UGT2B4.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en UGT2B4 para la investigación de la señalización de UGT2B4, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de UGT2B4 críticos para la función de UGT2B4
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de UGT2B4 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido UGT2B4 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido UGT2B4 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus UGT2B4. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR UGT2B4 (h) y el plásmido HDR UGT2B4 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología UGT2B4 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana UGT2B4 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.