UGT2B15 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-405610

Übersicht

UGT2B15 kodiert eine humane UDP-Glucuronosyltransferase, die die Phase‑II‑Glucuronidierung endogener Hormone und vielfältiger Xenobiotika katalysiert und dadurch deren Löslichkeit für die Ausscheidung erhöht. Als Enzym der UGT2‑Familie, das in der ER‑Membran verankert ist, trägt es zur metabolischen Clearance in der Leber und in extrahepatischen Geweben bei und beeinflusst durch konjugationsabhängige Inaktivierung die intrazelluläre Exposition gegenüber bioaktiven Steroiden. Unterschiede in der UGT2B15‑Aktivität können die Homöostase von Androgenen und anderen Steroiden verschieben, wodurch endokrine Signalnetzwerke und nachgeschaltete Transkriptionsprogramme beeinflusst werden. Veränderte Expression oder Polymorphismen wurden im Kontext hormonabhängiger Krebserkrankungen sowie interindividueller Unterschiede in Arzneistoffmetabolismus und Toxizitätsphänotypen untersucht.

Das UGT2B15 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des UGT2B15-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des UGT2B15-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von UGT2B15 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die UGT2B15-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von UGT2B15-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der UGT2B15-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf UGT2B15-Exone abzielen, die für die UGT2B15-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere UGT2B15-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom UGT2B15 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom UGT2B15 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des UGT2B15-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das UGT2B15 HDR-Plasmid (h) und UGT2B15 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von UGT2B15-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten UGT2B15-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.