UGT1A2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423602
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- UGT1A2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico UGT1A2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
UGT1A2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423602 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El gen murino Ugt1a2 codifica la UDP‑glucuronosiltransferasa 1A2 (UGT1A2), una enzima microsomal de conjugación de fase II que cataliza la glucuronidación de diversos metabolitos endógenos y xenobióticos. Al transferir ácido glucurónico a sustratos lipofílicos, UGT1A2 aumenta su solubilidad y favorece su eliminación a través de vías de desintoxicación hepáticas y extrahepáticas. La actividad de Ugt1a2 contribuye a la red más amplia dependiente de UGT1A que modula el destino de los compuestos químicos, las respuestas al estrés oxidativo y las interacciones con el metabolismo impulsado por citocromos P450. La perturbación genética o experimental de la conjugación mediada por UGT es relevante para estudios sobre farmacocinética alterada, susceptibilidad al daño químico y fenotipos ligados al metabolismo en modelos murinos de enfermedad.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO UGT1A2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Ugt1a2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Ugt1a2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Ugt1a2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína UGT1A2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Ugt1a2 para la investigación de la señalización de UGT1A2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Ugt1a2 críticos para la función de UGT1A2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Ugt1a2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido UGT1A2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido UGT1A2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Ugt1a2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR UGT1A2 (m) y el plásmido HDR UGT1A2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Ugt1a2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Ugt1a2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.