Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO UCK1 (m): sc-423608
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- UCK1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique UCK1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: UCK1 Antibody (E-9): sc-373940
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO UCK1 (m) | sc-423608 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Uck1 code l’uridine‑cytidine kinase 1 (UCK1), une enzyme cytosolique de la voie de sauvetage qui phosphoryle l’uridine et la cytidine en UMP et CMP, fournissant des nucléotides pyrimidiques nécessaires à la synthèse de l’ARN, à la réplication de l’ADN et au métabolisme des phospholipides membranaires. En régulant l’équilibre des pools nucléotidiques, UCK1 influence la capacité proliférative, la progression du cycle cellulaire et les réponses au stress liées aux besoins de réplication et de transcription. Dans les systèmes murins, l’activité d’UCK1 est fréquemment étudiée en parallèle de la synthèse de novo des pyrimidines et du transport des nucléosides afin de comprendre le remodelage métabolique et les flux compensatoires au sein de l’homéostasie des nucléotides. Une altération du métabolisme des pyrimidines est une caractéristique récurrente des troubles impliquant une prolifération dérégulée et le maintien du génome, ce qui fait d’Uck1 un point d’entrée utile pour des études mécanistiques ciblées sur les voies.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO UCK1 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Uck1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Uck1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Uck1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine UCK1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Uck1 pour l'étude de la signalisation de UCK1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Uck1 essentiels à la fonction de UCK1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Uck1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le UCK1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le UCK1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Uck1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le UCK1 plasmide HDR (m) et le UCK1 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Uck1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Uck1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.