Plásmido Doble Nickase (h) UBE2U: sc-409509-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)UBE2U consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa UBE2U (h) y el plásmido de doble nickasa UBE2U (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a UBE2U. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) UBE2U | sc-409509-NIC | 20 µg | $410.00 |
UBE2U codifica una enzima E2 conjugadora de ubiquitina que colabora con las ligasas E1 y E3 para transferir ubiquitina activada a proteínas sustrato, modulando así la proteostasis y la señalización dependiente de ubiquitina. Mediante la regulación de la ubiquitinación, UBE2U puede influir en el recambio proteico, el tráfico intracelular y las vías de control de calidad que se entrecruzan con el control del ciclo celular y las respuestas al estrés. La actividad desregulada de la vía de ubiquitina está implicada de forma amplia en la señalización oncogénica y en la neurodegeneración, lo que convierte a UBE2U en un nodo útil para analizar cómo la conjugación de ubiquitina modula la homeostasis celular. La investigación sobre UBE2U respalda estudios mecanísticos del cableado de la red de ubiquitina, la selección de sustratos y la interacción entre vías en células humanas.
UBE2U El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus UBE2U en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de UBE2U. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de UBE2U. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con UBE2U alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.