Type I 4-phosphatase双切口酶质粒(h): sc-404750-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Type I 4-phosphatase 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Type I 4-phosphatase双切酶质粒（h）和Type I 4-phosphatase双切酶质粒（h2）编码针对INPP4A的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Type I 4-phosphatase: sc-390549，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Type I 4-phosphatase双切口酶质粒(h) | sc-404750-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Type I 4-phosphatase双切口酶质粒(h2) | sc-404750-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
INPP4A 编码 I 型 4-磷酸酶（type I 4-phosphatase），这是一种肌醇多磷酸 4-磷酸酶，能够将磷脂酰肌醇 3,4-二磷酸（PI(3,4)P2）水解为磷脂酰肌醇 3-磷酸（PI3P），从而重塑膜上磷脂酰肌醇（phosphoinositide）的组成库。通过这一活性，它调控依赖 PI3K 的信号传导动态，影响含 PH 结构域效应蛋白的募集、内体膜身份的建立，以及对细胞生长与存活程序的下游控制。INPP4A 的功能与受体介导的信号传导和囊泡运输过程相交织，这些过程共同协调营养感知与应激反应。文献报道显示，INPP4A 及 PI(3,4)P2 周转的调控异常与癌症生物学和神经生物学相关的信号网络失衡有关，为研究通路重连的机制提供了依据。
Type I 4-phosphatase 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 INPP4A 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对INPP4A内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏INPP4A的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了INPP4A基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。