TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400458

Descripción general

NKX2-1 (TTF-1, factor de transcripción tiroideo 1) codifica un factor de transcripción con dominio homeobox de unión al ADN que establece y mantiene programas de linaje en desarrollo y en la tiroides adulta, el epitelio pulmonar y el prosencéfalo ventral. Regula redes génicas que controlan la diferenciación epitelial, la homeostasis del surfactante y la morfogénesis de órganos, coordinando estados transcripcionales que se entrecruzan con vías de señalización del desarrollo como Wnt, BMP y FGF. En la biología de la enfermedad humana, la alteración de la dosis de NKX2-1 o sus mutaciones se asocian a fenotipos congénitos cerebro–pulmón–tiroides y contribuyen a una reprogramación transcripcional dependiente del contexto en patologías pulmonares y tiroideas. Dado que NKX2-1 actúa como un regulador maestro de la identidad celular, se estudia con frecuencia en modelos de diferenciación, transiciones de estado epitelial y mecanismos de dependencia de linaje oncogénica.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen NKX2-1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del NKX2-1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de NKX2-1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en NKX2-1 para la investigación de la señalización de TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de NKX2-1 críticos para la función de TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de NKX2-1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus NKX2-1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1 (h) y el plásmido HDR TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología NKX2-1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana NKX2-1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.