TTC1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-426212

Descripción general

El gen murino Ttc1 codifica la proteína 1 con dominio de repeticiones tetratricopeptídicas (TTC1), un andamiaje que contiene TPR e implicado en interacciones proteína–proteína que coordinan el plegamiento y el tráfico de complejos multiproteicos. TTC1 se ha asociado con procesos vinculados a chaperonas y con la regulación de nodos de señalización que influyen en la respuesta al estrés celular, la proteostasis y la organización del citoesqueleto o de los orgánulos. A través de estas funciones, TTC1 puede afectar la progresión del ciclo celular y los programas de diferenciación al modular la estabilidad y el ensamblaje de factores reguladores clave. La desregulación de la proteostasis y de la homeostasis de la señalización es ampliamente relevante en contextos de investigación sobre neurodesarrollo y neurodegeneración, así como en biología tumoral, lo que convierte a Ttc1 en un locus útil para estudios mecanísticos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TTC1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Ttc1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Ttc1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Ttc1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TTC1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Ttc1 para la investigación de la señalización de TTC1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Ttc1 críticos para la función de TTC1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Ttc1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TTC1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido TTC1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Ttc1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TTC1 (m) y el plásmido HDR TTC1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Ttc1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Ttc1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.