TSSC4 Double Nickase Plasmid (h): sc-410490-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das TSSC4 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- TSSC4 Double-Nickase-Plasmid (h) und TSSC4 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf TSSC4 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
TSSC4 Double Nickase Plasmid (h) | sc-410490-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TSSC4 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-410490-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TSSC4 (Tumorsuppressor, subtransferierbarer Kandidat 4) ist ein humanes protein-kodierendes Gen, das ursprünglich der imprägnierten Region 11p15.5 zugeordnet wurde und im Zusammenhang mit Wachstumsregulation und Tumorbiologie untersucht wird. Obwohl seine molekulare Funktion bislang nicht vollständig geklärt ist, wird TSSC4 mit zellulären Programmen in Verbindung gebracht, die Proliferation und Überleben steuern, und seine genomische Nachbarschaft wird häufig hinsichtlich epigenetischer Regulation und allelspezifischer Expression analysiert. Eine Fehlregulation innerhalb des 11p15.5-Lokus ist mit Entwicklungs-Wachstumsstörungen und onkogenen Prozessen assoziiert, was TSSC4 zu einem nützlichen Ziel für mechanistische Studien zu Imprinting-assoziierten Signalwegen macht. Die experimentelle Perturbation von TSSC4 unterstützt die Untersuchung, wie lokusweite Regulation das Zellzyklusverhalten und stressresponsive transkriptionelle Netzwerke beeinflusst.
TSSC4 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des TSSC4-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von TSSC4 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die TSSC4-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit TSSC4-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.