TSPAN18 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405937

Descripción general

TSPAN18 codifica una proteína de membrana de la familia de las tetraspaninas que ayuda a organizar microdominios enriquecidos en tetraspaninas, coordinando interacciones laterales entre receptores, moléculas de adhesión y adaptadores de señalización en la membrana plasmática. Mediante estas funciones de andamiaje, TSPAN18 puede influir en procesos como la comunicación célula-célula, el tráfico de membrana y la integración de señales que determinan programas de activación y motilidad celular. La expresión y la variación genética en tetraspaninas, incluida TSPAN18, se han relacionado en la literatura con fenotipos asociados a las plaquetas y con la biología vascular, lo que respalda el uso de este blanco en estudios de señalización vinculada a la hemostasia y a respuestas inflamatorias. El análisis detallado de la función de TSPAN18 puede aclarar cómo la composición de los microdominios de membrana modula vías downstream relevantes para mecanismos de enfermedad cardiovascular y asociada al sistema inmunitario.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TSPAN18 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TSPAN18 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TSPAN18 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TSPAN18 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TSPAN18.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TSPAN18 para la investigación de la señalización de TSPAN18, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de TSPAN18 críticos para la función de TSPAN18
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TSPAN18 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TSPAN18 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido TSPAN18 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TSPAN18. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TSPAN18 (h) y el plásmido HDR TSPAN18 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TSPAN18 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TSPAN18 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.