TSHβ CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-423526

개요

Tshb는 갑상선자극호르몬의 베타 소단위(TSHβ)를 암호화하며, TSHβ는 뇌하수체 유래 당단백질 호르몬의 구성 성분으로서 갑상선에서 TSH 신호전달이 수용체 특이성을 갖도록 합니다. 갑상선자극세포(thyrotroph)에서 Tshb 발현은 시상하부의 갑상선자극호르몬방출호르몬(TRH)과 갑상선호르몬에 의한 음성 되먹임에 의해 조절되며, 내분비 항상성과 뇌하수체의 분화 및 호르몬 분비를 좌우하는 전사 프로그램을 통합합니다. TSHβ에 의해 유도되는 TSH 수용체 활성화는 갑상선호르몬 생합성과 전신 대사 조절을 촉진하여, 이 축을 성장, 에너지 균형, 열발생(thermogenesis)과 같은 과정과 연결합니다. Tshb 및 상위의 시상하부–뇌하수체–갑상선 되먹임 조절의 이상은 중추성 갑상선 축 기능장애의 실험 모델과, 발달 및 대사에 영향을 미치는 내분비 표현형과 관련이 있습니다.

TSHβ CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Tshb 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Tshb 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Tshb의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 TSHβ 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 TSHβ 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Tshb 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• TSHβ 기능에 중요한 Tshb 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Tshb 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• TSHβ CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 TSHβ CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Tshb 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  TSHβ HDR 플라스미드 (m) 및 TSHβ HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Tshb 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Tshb 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.