TRPC5 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403745-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TRPC5O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase TRPC5 (h) e o Plasmídeo Double Nickase TRPC5 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TRPC5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TRPC5 Anticorpo (1C8): sc-293259
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TRPC5 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403745-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TRPC5 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403745-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TRPC5 (membro 5 da subfamília C de canais catiônicos do potencial receptor transitório) codifica um canal catiônico não seletivo, permeável a Ca2+, que atua como sensor de sinais extracelulares e intracelulares para regular a excitabilidade da membrana e a sinalização dependente de cálcio. Em células humanas, o TRPC5 contribui para a entrada de cálcio operada por receptores a jusante de vias de GPCRs e de receptores tirosina-quinase, convergindo com a sinalização de PLC, o metabolismo de fosfoinositídeos e programas transcricionais a jusante, como NFAT e MAPK. A atividade do TRPC5 influencia a dinâmica do citoesqueleto, a migração celular e a função de barreira por meio de efetores dependentes de Ca2+, ligando a abertura do canal a respostas mecanicoquímicas. A sinalização desregulada de TRPC5 tem sido associada a contextos relevantes para a neurobiologia, a fisiologia renal e cardiovascular e respostas ao estresse celular, tornando-o um alvo útil para dissecar vias de sinalização em modelos relevantes para doenças.
TRPC5 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TRPC5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TRPC5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TRPC5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TRPC5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.