Troponin C slow skeletal CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-423431
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Troponin C slow skeletal CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（m） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在Troponin C slow skeletal基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
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Troponin C slow skeletal CRISPR/Cas9 KO质粒 (m) | sc-423431 | 20 µg | $397.00 |
概述
Tnnc1 编码慢骨骼肌肌钙蛋白C（troponin C slow skeletal），这是肌钙蛋白复合体中一种可结合 Ca2+ 的调节亚基，负责将细胞质内钙瞬变与横纹肌中肌动蛋白–肌球蛋白交联桥循环相耦联。TNNC1 通过发生 Ca2+ 依赖性的构象变化，调控原肌球蛋白在细丝上的定位，并在慢肌纤维及心脏中精细调节收缩动力学、舒张以及能量效率。这种钙感知功能与兴奋–收缩耦联及肌小节组织相关通路相整合，将细胞内 Ca2+ 处理与肌丝对刺激的反应性联系起来。TNNC1 及细丝 Ca2+ 敏感性的失调与遗传性心肌病和收缩功能障碍有关，因此常用于研究肌小节生物学与肌肉疾病机制。
Troponin C slow skeletal CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Tnnc1基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Tnnc1基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Tnnc1开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使Troponin C slow skeletal蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建Tnnc1缺失的细胞模型，用于Troponin C slow skeletal信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 Troponin C slow skeletal 功能至关重要的 Tnnc1 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 Tnnc1 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 Troponin C slow skeletal CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 Troponin C slow skeletal CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Tnnc1 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 Troponin C slow skeletal HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 Troponin C slow skeletal HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Tnnc1同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Tnnc1靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。