TrkB Lentiviral Activation Particles (h): sc-400142-LAC

NTRK2は受容体型チロシンキナーゼであるTrkBをコードしており、BDNFおよびNT-4/5に対する高親和性のニューロトロフィン受容体として、神経細胞の生存・分化、シナプス可塑性、ならびに活動依存的な回路リモデリングを制御します。リガンド結合により、TrkBはPI3K–AKT、RAS–MAPK/ERK、PLCγ–Ca2+といった代表的なシグナル伝達カスケードを活性化し、神経突起の伸長やシナプス機能を形作る転写プログラムと細胞骨格ダイナミクスを協調的に調節します。NTRK2/TrkBシグナルの制御異常は、神経発達の変化や神経精神疾患様の表現型と関連づけられており、またニューロトロフィン経路が関与するがんにおいて、受容体活性や発現の異常が研究されています。細胞外のニューロトロフィン刺激と細胞内のキナーゼシグナルを統合する結節点として、TrkBはヒト細胞モデルにおける経路間クロストーク、神経回路の連結性、ならびに文脈依存的なシグナル出力を解析するために広く用いられています。

TrkB レンチウイルス活性化粒子（h）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なNTRK2の発現上昇を可能にします。

TrkB レンチウイルス活性化粒子（h）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、NTRK2転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性TrkBの発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のNTRK2ゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。