Plásmido Doble Nickase (h) TRIP13: sc-404006-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)TRIP13 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa TRIP13 (h) y el plásmido de doble nickasa TRIP13 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a TRIP13. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: TRIP13 Anticuerpo (A-7): sc-514285
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) TRIP13 | sc-404006-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) TRIP13 | sc-404006-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TRIP13 (interactor 13 del receptor de la hormona tiroidea) codifica una ATPasa AAA+ que remodela proteínas con dominio HORMA para regular el silenciamiento del punto de control del ensamblaje del huso y garantizar una segregación cromosómica precisa durante la mitosis. Al controlar la estabilidad de las uniones cinetocoro–microtúbulo y la señalización del punto de control, TRIP13 contribuye a la integridad del genoma y a la progresión adecuada del ciclo celular. La actividad desregulada de TRIP13 se ha asociado con inestabilidad cromosómica y cambios en la capacidad proliferativa, lo que la convierte en un factor relevante en estudios de aneuploidía, respuestas al daño del ADN y biología tumoral. Por ello, el análisis funcional de TRIP13 resulta informativo para comprender las vías que conectan la vigilancia mitótica con la estabilidad genómica y las decisiones de destino celular.
TRIP13 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus TRIP13 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de TRIP13. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de TRIP13. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con TRIP13 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.