Plasmide Double Nickase (h) TRIP12: sc-403860-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) TRIP12 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TRIP12 Double Nickase (h) et le plasmide TRIP12 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TRIP12. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) TRIP12 | sc-403860-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) TRIP12 | sc-403860-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TRIP12 code une ligase E3 ubiquitine-protéine (également appelée ULF) qui favorise l’ubiquitination des substrats et leur dégradation par le protéasome, modulant ainsi l’homéostasie protéique et l’amplitude des signaux. Elle est impliquée dans les réponses aux dommages de l’ADN et le contrôle du cycle cellulaire via la régulation de voies clés des points de contrôle et des suppresseurs de tumeur, notamment par la modulation de l’activité de l’axe p14ARF–MDM2–p53. En influençant le contrôle qualité dépendant de l’ubiquitine, TRIP12 contribue à la stabilité du génome et à l’adaptation au stress cellulaire. Une altération de la fonction ou de l’expression de TRIP12 a été associée à une prolifération dérégulée et à des phénotypes neurodéveloppementaux, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques en biologie du cancer et dans des modèles neuronaux.
TRIP12 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TRIP12 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TRIP12. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TRIP12. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TRIP12.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.