TRIM69 Plasmide Double Nickase (h): sc-404906-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- TRIM69 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il TRIM69 Double Nickase Plasmid (h) e il TRIM69 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira TRIM69. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
TRIM69 Plasmide Double Nickase (h) | sc-404906-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TRIM69 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404906-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TRIM69 codifica una ligasi E3 dell’ubiquitina della famiglia dei motivi tripartiti (TRIM), implicata nella regolazione ubiquitina-dipendente della stabilità proteica e della segnalazione. In quanto proteina RING–B-box–coiled-coil, TRIM69 è associata al controllo dell’immunità innata nelle risposte antivirali e alla modulazione delle vie correlate all’interferone, influenzando il turnover o l’attività di intermedi chiave della segnalazione. Alterazioni dei programmi di ubiquitinazione della famiglia TRIM possono rimodellare la segnalazione infiammatoria, le risposte allo stress e le transizioni di stato cellulare, rendendo TRIM69 rilevante per studi meccanicistici sulla regolazione immunitaria e sulle interazioni ospite–patogeno. La disregolazione dei circuiti di ubiquitinazione associati a TRIM69 è stata inoltre esplorata in contesti in cui una proteostasi aberrante e una segnalazione immunitaria alterata contribuiscono a fenotipi di malattia.
TRIM69 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus TRIM69 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di TRIM69. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di TRIM69. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con TRIM69 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.