TRIM44 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-412330

Descripción general

TRIM44 (motivo tripartito que contiene 44) codifica una proteína de la familia TRIM implicada en la regulación dependiente de ubiquitina de la estabilidad de las proteínas y de la salida de señalización. Aunque presenta una composición de dominios atípica en comparación con muchas ligasas E3 TRIM, TRIM44 se ha relacionado con la modulación de redes de proteostasis y de señalización sensible al estrés, influyendo en procesos como el crecimiento celular, la supervivencia y la motilidad. Se ha informado de una expresión desregulada de TRIM44 en múltiples tipos de tumores y con frecuencia se asocia con fenotipos más invasivos y con actividad alterada de vías, incluidas las de señalización asociadas a PI3K/AKT y NF-κB. Estas propiedades convierten a TRIM44 en un objetivo útil para estudios mecanísticos de la regulación ligada a ubiquitina, el crosstalk entre vías y la señalización oncogénica dependiente del contexto.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TRIM44 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TRIM44 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TRIM44 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TRIM44 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TRIM44.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TRIM44 para la investigación de la señalización de TRIM44, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de TRIM44 críticos para la función de TRIM44
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TRIM44 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TRIM44 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido TRIM44 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TRIM44. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TRIM44 (h) y el plásmido HDR TRIM44 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TRIM44 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TRIM44 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.