TRIM41 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-413871

Visão geral

O TRIM41 codifica uma proteína contendo motivo tripartido (TRIM), com atividade de ligase E3 de ubiquitina do tipo “RING finger”, que contribui para a proteostase dependente de ubiquitina e para a regulação de complexos de sinalização. Como parte das redes da família TRIM, o TRIM41 está implicado no controle da estabilidade e da renovação (turnover) de proteínas, influenciando vias associadas à regulação da imunidade inata, às respostas ao estresse e à manutenção da homeostase celular. Dinâmicas alteradas de ubiquitinação envolvendo proteínas TRIM têm sido associadas à sinalização inflamatória desregulada e a fenótipos oncogênicos, tornando o TRIM41 um alvo útil para dissecar as contribuições da via da ubiquitina para estados celulares relevantes em doenças. A investigação funcional do TRIM41 dá suporte a estudos de reconhecimento de substratos, de “crosstalk” entre modificações pós-traducionais e de efeitos em nível de via sobre resultados transcricionais e proteômicos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TRIM41 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene TRIM41 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do TRIM41, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do TRIM41 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TRIM41.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de TRIM41 para a investigação da sinalização de TRIM41, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) TRIM41 críticos para a função TRIM41
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos TRIM41 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo TRIM41 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo TRIM41 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus TRIM41. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo TRIM41 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR TRIM41 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia TRIM41 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo TRIM41 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.