TRIM41 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-413871

Descripción general

TRIM41 codifica una proteína con motivo tripartito (TRIM) que contiene un dominio RING con actividad de ligasa E3 de ubiquitina, lo que contribuye a la proteostasis dependiente de ubiquitina y a la regulación de complejos de señalización. Como parte de las redes de la familia TRIM, TRIM41 está implicada en el control de la estabilidad y el recambio de proteínas, influyendo en vías relacionadas con la regulación de la inmunidad innata, las respuestas al estrés y el mantenimiento de la homeostasis celular. Las dinámicas alteradas de ubiquitinación en las que participan proteínas TRIM se han asociado con una señalización inflamatoria desregulada y fenotipos oncogénicos, por lo que TRIM41 constituye una diana útil para analizar cómo las vías de la ubiquitina contribuyen a estados celulares relevantes para la enfermedad. El estudio funcional de TRIM41 respalda investigaciones sobre el reconocimiento de sustratos, la interacción entre modificaciones postraduccionales y los efectos a nivel de vías sobre los resultados transcripcionales y proteómicos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TRIM41 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TRIM41 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TRIM41 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TRIM41 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TRIM41.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TRIM41 para la investigación de la señalización de TRIM41, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de TRIM41 críticos para la función de TRIM41
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TRIM41 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TRIM41 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido TRIM41 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TRIM41. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TRIM41 (h) y el plásmido HDR TRIM41 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TRIM41 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TRIM41 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.