Plasmide Double Nickase (h) TRIM37: sc-407390-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) TRIM37 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TRIM37 Double Nickase (h) et le plasmide TRIM37 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TRIM37. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: TRIM37 Antibody (C-6): sc-515044
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) TRIM37 | sc-407390-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) TRIM37 | sc-407390-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TRIM37 code une ligase E3 d’ubiquitine de type RING appartenant à la famille TRIM, qui régule l’ubiquitination des protéines, la protéostasie et des processus associés au cycle cellulaire. TRIM37 se localise dans des compartiments cytoplasmiques et périnucléaires et a été impliquée dans la régulation du centrosome et du matériel péricentriolaire, influençant la stabilité du génome et la fidélité mitotique. Par le contrôle, dépendant de l’ubiquitine, de protéines de signalisation et de protéines structurales, TRIM37 s’insère dans des voies qui gouvernent les réponses aux dommages de l’ADN, la prolifération cellulaire et l’adaptation au stress. Une activité dérégulée de TRIM37 est associée à des syndromes du développement et a été rapportée dans des contextes de contrôle de croissance altéré et d’instabilité génomique, ce qui soutient sa pertinence pour des études mécanistiques en biologie des maladies.
TRIM37 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TRIM37 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TRIM37. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TRIM37. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TRIM37.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.