TRIM34 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-417920

Descripción general

TRIM34 codifica una ligasa E3 de ubiquitina con motivo tripartito de la familia TRIM, implicada en la regulación de la inmunidad innata y en la restricción antiviral. A través de sus dominios RING, B-box y de bobina enrollada (coiled-coil), TRIM34 puede influir en la señalización dependiente de ubiquitina y en el recambio de proteínas, modulando vías como las respuestas estimuladas por interferón y la señalización de receptores de reconocimiento de patrones. La actividad alterada de la familia TRIM se asocia con frecuencia a inflamación desregulada y a interacciones huésped–patógeno, lo que hace que TRIM34 sea relevante para estudiar mecanismos que modulan la homeostasis inmunitaria. TRIM34 también se utiliza como regulador candidato en análisis a nivel de sistemas de la biología de la infección y de fenotipos de enfermedades asociadas al sistema inmunitario.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TRIM34 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TRIM34 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TRIM34 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TRIM34 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TRIM34.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TRIM34 para la investigación de la señalización de TRIM34, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de TRIM34 críticos para la función de TRIM34
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TRIM34 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TRIM34 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido TRIM34 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TRIM34. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TRIM34 (h) y el plásmido HDR TRIM34 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TRIM34 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TRIM34 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.