Plásmido Doble Nickase (h) TRIM16: sc-409792-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)TRIM16 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa TRIM16 (h) y el plásmido de doble nickasa TRIM16 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a TRIM16. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: TRIM16 Anticuerpo (B-6): sc-398851
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) TRIM16 | sc-409792-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) TRIM16 | sc-409792-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TRIM16 codifica una proteína de la familia de motivos tripartitos (TRIM) que actúa como ligasa E3 de ubiquitina y como factor de andamiaje, coordinando el recambio proteico, la dinámica del citoesqueleto y la señalización sensible al estrés. TRIM16 se ha relacionado con la regulación de la organización de los filamentos intermedios, la proteostasis y la modulación de programas transcripcionales que influyen en la diferenciación y la motilidad celulares. A través de mecanismos dependientes de ubiquitina e interacciones proteína–proteína, TRIM16 puede afectar vías que gobiernan las respuestas inmunitarias innatas, la adaptación al estrés oxidativo y el control del crecimiento. La expresión o actividad alteradas de TRIM16 se han asociado con la biología tumoral y fenotipos inflamatorios, lo que la convierte en una diana útil para estudios mecanísticos de redes de señalización y de la homeostasis celular.
TRIM16 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus TRIM16 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de TRIM16. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de TRIM16. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con TRIM16 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.