TRIL CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406056

Übersicht

TRIL (TLR4-Interaktor mit leucinreichen Wiederholungen) ist ein transmembranöses akzessorisches Protein, das die angeborene Immun-Signalübertragung moduliert, indem es Toll-like-Rezeptor‑4‑abhängige Antworten erleichtert, insbesondere in Mikroglia und anderen Kontexten der myeloischen Zelllinie. Über Interaktionen, die den Rezeptortransport und die Ligandenansprechbarkeit unterstützen, beeinflusst TRIL nachgeschaltete, an MyD88- und TRIF gekoppelte Signalwege, die zu NF‑κB- und IRF-Transkriptionsprogrammen führen. Seine Aktivität trägt zur Regulation von Zytokin- und Interferon-Ausgaben bei und formt dadurch neuroinflammatorische und inflammatorische Signalnetzwerke. Eine fehlregulierte TRIL-assoziierte Signalgebung wurde im Zusammenhang mit inflammatorischen und neuroinflammatorischen Mechanismen untersucht, die für Erkrankungen relevant sind, bei denen TLR4-getriebene Antworten beteiligt sind.

Das TRIL CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des TRIL-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des TRIL-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von TRIL nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die TRIL-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von TRIL-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der TRIL-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf TRIL-Exone abzielen, die für die TRIL-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere TRIL-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom TRIL CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom TRIL CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des TRIL-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das TRIL HDR-Plasmid (h) und TRIL HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von TRIL-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten TRIL-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.