Partículas Lentivirales de Activación (h) TREX-1: sc-403875-LAC

El TREX1 humano codifica TREX-1, una exonucleasa de ADN 3′→5′ que degrada el ADN citosólico aberrante originado por retroelementos endógenos, intermediarios de replicación detenidos o una reparación defectuosa del ADN. Al limitar la acumulación de ADN inmunoestimulador, TREX-1 suprime la activación del eje cGAS–STING y la señalización posterior de interferón de tipo I, vinculando así la integridad del genoma con la homeostasis inmunitaria innata. La actividad desregulada de TREX-1 se asocia con fenotipos inflamatorios impulsados por interferón y mecanismos de enfermedad autoinmune, y la alteración de la depuración de ADN también puede influir en las respuestas al estrés replicativo y en las interacciones tumor–inmunidad. Por ello, TREX1 se estudia ampliamente en vías que regulan el metabolismo del ADN, la detección de ácidos nucleicos y la señalización inflamatoria en tipos celulares relevantes.

Las partículas de activación lentiviral TREX-1 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de TREX1 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral TREX-1 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción TREX1, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de TREX-1. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo TREX1 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.