TRAPPC10 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406491

Descripción general

TRAPPC10 codifica una subunidad central del complejo TRAPP (partícula proteica de transporte), que favorece el anclaje de vesículas y el tráfico de membranas a lo largo del sistema secretor temprano y del sistema endomembranoso. Gracias a su papel en la coordinación del transporte vesicular y de etapas de tráfico asociadas al Golgi y al retículo endoplásmico (RE), TRAPPC10 contribuye a la clasificación intracelular de proteínas, la homeostasis de los orgánulos y la entrega de cargamentos necesaria para la fisiología celular normal. La alteración de componentes del complejo TRAPP puede perturbar el flujo de la vía secretora y las respuestas al estrés, lo que hace que TRAPPC10 sea relevante para estudios mecanísticos de señalización dependiente del tráfico y de programas de mantenimiento celular. El transporte vesicular alterado también se asocia con fenotipos del neurodesarrollo y neurodegenerativos, lo que sitúa a TRAPPC10 como una diana útil para modelar en células humanas mecanismos de enfermedad vinculados al tráfico.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TRAPPC10 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TRAPPC10 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TRAPPC10 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TRAPPC10 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TRAPPC10.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TRAPPC10 para la investigación de la señalización de TRAPPC10, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de TRAPPC10 críticos para la función de TRAPPC10
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TRAPPC10 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TRAPPC10 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido TRAPPC10 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TRAPPC10. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TRAPPC10 (h) y el plásmido HDR TRAPPC10 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TRAPPC10 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TRAPPC10 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.