Plasmide Double Nickase (h) translin: sc-407354-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) translin correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide translin Double Nickase (h) et le plasmide translin Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TSN. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: translin Antibody (C-2): sc-390472
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) translin | sc-407354-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) translin | sc-407354-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TSN code la transline, une protéine conservée de liaison aux acides nucléiques qui forme un complexe avec trax et contribue au métabolisme de l’ARN, notamment à la régulation de la stabilité des ARNm, de leur transport et des voies des petits ARN. La transline a été associée au contrôle post‑transcriptionnel de l’expression génique dans le cytoplasme et le noyau, et elle est impliquée dans des processus tels que les réponses au stress et la fonction neuronale via la modulation du devenir des ARN. Une activité altérée de TSN/transline a été associée dans la littérature à des programmes d’expression génique dérégulés observés en cancérologie ainsi qu’à des phénotypes neurodéveloppementaux ou neuropsychiatriques. Ces caractéristiques font de TSN un nœud utile pour étudier la régulation de l’état cellulaire centrée sur l’ARN et la plasticité des voies de signalisation.
translin Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TSN dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TSN. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TSN. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TSN.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.