TRAF7 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-404992

Übersicht

TRAF7 kodiert eine E3-Ubiquitin-Ligase und ein Adapterprotein aus der Familie der TNF-Rezeptor-assoziierten Faktoren, das rezeptornahe Signalübertragung mit einer ubiquitinabhängigen Kontrolle der Proteinstabilität verknüpft. TRAF7 reguliert mehrere Stress- und Entzündungswege, darunter die MAPK- und NF-κB-Signalgebung, und beeinflusst über die Ubiquitinierung zentraler Signalkomponenten Apoptose, Zytoskelettorganisation und Zellpolarität. Eine fehlregulierte TRAF7-Aktivität sowie wiederkehrende TRAF7-Mutationen wurden in mehreren Tumorkontexten beschrieben, was Rollen in onkogener Signalgebung, Transkriptionskontrolle und Antworten des Mikromilieus nahelegt. Als Knotenpunkt in Signalwegen wird TRAF7 häufig im Zusammenhang mit Proteostase, Signaltransduktion und kontextabhängiger Wachstumskontrolle untersucht.

Das TRAF7 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des TRAF7-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des TRAF7-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von TRAF7 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die TRAF7-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von TRAF7-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der TRAF7-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf TRAF7-Exone abzielen, die für die TRAF7-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere TRAF7-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom TRAF7 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom TRAF7 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des TRAF7-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das TRAF7 HDR-Plasmid (h) und TRAF7 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von TRAF7-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten TRAF7-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.