Plásmido Doble Nickase (h) TRAF6: sc-400117-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)TRAF6 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa TRAF6 (h) y el plásmido de doble nickasa TRAF6 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a TRAF6. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: TRAF6 Anticuerpo (D-10): sc-8409
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) TRAF6 | sc-400117-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) TRAF6 | sc-400117-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El TRAF6 humano codifica una ligasa E3 de ubiquitina y una proteína adaptadora que acopla la señalización de la superfamilia de receptores del TNF y de los receptores Toll/IL‑1 a la activación downstream de las vías NF‑κB y MAPK. Mediante la poliubiquitinación enlazada a K63 de dianas como TAK1 y componentes del complejo IKK, TRAF6 ayuda a coordinar programas transcripcionales inflamatorios, respuestas inmunitarias innatas y señalización de estrés. TRAF6 también contribuye a la diferenciación de osteoclastos a través de la señalización RANK–RANKL, vinculándolo con la remodelación ósea y la comunicación cruzada entre el sistema inmune y el esqueleto. La desregulación de la señalización de TRAF6 se ha asociado con inflamación crónica, fenotipos autoinmunes y reconfiguración oncogénica de vías de señalización en múltiples contextos tumorales.
TRAF6 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus TRAF6 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de TRAF6. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de TRAF6. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con TRAF6 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.