Plásmido Doble Nickase (h) TRAF3: sc-400473-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)TRAF3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa TRAF3 (h) y el plásmido de doble nickasa TRAF3 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a TRAF3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: TRAF3 Anticuerpo (G-6): sc-6933
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) TRAF3 | sc-400473-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) TRAF3 | sc-400473-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TRAF3 (factor 3 asociado al receptor de TNF) es una proteína adaptadora y ligasa E3 de ubiquitina que coordina la señalización aguas abajo de miembros de la superfamilia de receptores de TNF, de los receptores tipo Toll y de determinados receptores de reconocimiento de patrones. Al regular el ensamblaje dependiente de ubiquitina de complejos de señalización, TRAF3 modula las respuestas de interferón de tipo I, la actividad de MAPK y la salida de la vía NF-κB, incluida la contención de la señalización no canónica de NF-κB mediante el control de la estabilidad de NIK. Estas funciones sitúan a TRAF3 como un determinante clave de la homeostasis inmunitaria innata y adaptativa, influyendo en la producción de citocinas, la señalización de receptores de antígeno y las decisiones de supervivencia celular. La expresión o la función alteradas de TRAF3 se asocian con disrregulación inmunitaria y se han descrito en contextos de señalización vinculados a malignidad, lo que respalda su uso como un nodo mecanístico en la investigación de la inflamación y la biología del cáncer.
TRAF3 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus TRAF3 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de TRAF3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de TRAF3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con TRAF3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.