TP53INP2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-427155

Descripción general

Trp53inp2 codifica TP53INP2, una proteína nuclear y citoplasmática inducible por estrés, implicada en la regulación de la autofagia y de programas transcripcionales vinculados a la homeostasis celular. Se ha descrito que TP53INP2 participa en la formación y el tráfico de autofagosomas mediante interacciones con la maquinaria de la autofagia, apoyando vías de detección de nutrientes y de control de calidad de orgánulos. En modelos murinos y sistemas celulares, la actividad de TP53INP2 se examina comúnmente en el contexto de la adaptación metabólica, las decisiones de supervivencia celular y las respuestas al estrés oxidativo o genotóxico. La desregulación de la autofagia y de la señalización de estrés asociadas a TP53INP2 es relevante para estudios de biología tumoral, estados inflamatorios y procesos neurodegenerativos en los que la alteración de la proteostasis es una característica clave.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TP53INP2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Trp53inp2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Trp53inp2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Trp53inp2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TP53INP2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Trp53inp2 para la investigación de la señalización de TP53INP2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Trp53inp2 críticos para la función de TP53INP2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Trp53inp2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TP53INP2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido TP53INP2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Trp53inp2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TP53INP2 (m) y el plásmido HDR TP53INP2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Trp53inp2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Trp53inp2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.