Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (m) Tom70: sc-424331-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)Tom70 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Tom70 (m) y el plásmido de doble nickasa Tom70 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Tomm70a. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Tom70 Anticuerpo (A-8): sc-390545
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) Tom70 | sc-424331-NIC | 20 µg | $410.00 |
El gen murino **Tomm70a** codifica Tom70, un receptor de importación de la membrana externa mitocondrial que reconoce señales internas de direccionamiento y coopera con chaperonas para entregar proteínas precursoras hidrofóbicas al complejo TOM para su translocación. Tom70 favorece la proteostasis mitocondrial y la capacidad bioenergética al facilitar la importación de proteínas transportadoras y de otros componentes mitocondriales codificados en el núcleo, lo que lo vincula con la fosforilación oxidativa y la adaptación metabólica. La alteración de la importación dependiente de Tom70 puede promover señales de estrés mitocondrial, cambios en el manejo de especies reactivas de oxígeno y la remodelación de las vías de apoptosis e inmunidad innata en la mitocondria. La desregulación de la importación de proteínas mitocondriales y de la función de los receptores de la membrana externa es relevante para mecanismos estudiados en neurodegeneración, disfunción cardiometabólica y metabolismo de células cancerosas.
Tom70 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Tomm70a en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Tomm70a. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Tomm70a. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Tomm70a alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.