Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide Double Nickase (h) TOK-1: sc-406452-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) TOK-1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TOK-1 Double Nickase (h) et le plasmide TOK-1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant BCCIP. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: TOK-1β Antibody (B-10): sc-271985
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) TOK-1 | sc-406452-NIC | 20 µg | $410.00 |
BCCIP (protéine interagissant avec BRCA2 et CDKN1A/p21) code un facteur conservé qui contribue à la stabilité du génome via ses interactions avec BRCA2 et p21/CDKN1A, reliant la réparation de l’ADN au contrôle du cycle cellulaire. BCCIP participe à la recombinaison homologue, aux réponses au stress de réplication et à la signalisation des points de contrôle, et a été impliquée dans le maintien de l’intégrité chromosomique pendant la phase S. Une expression ou une fonction altérée de BCCIP a été associée à des réponses défectueuses aux dommages de l’ADN et à une instabilité génomique accrue, des caractéristiques fréquemment observées en biologie du cancer. Par conséquent, BCCIP constitue une cible utile pour disséquer les voies de réparation de l’ADN, le contrôle de la prolifération et les mécanismes qui couplent la réplication à l’activation des points de contrôle dans les cellules humaines.
TOK-1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus BCCIP dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de BCCIP. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de BCCIP. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de BCCIP.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.