Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Plásmido Doble Nickase (h) TOK-1: sc-406452-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)TOK-1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa TOK-1 (h) y el plásmido de doble nickasa TOK-1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a BCCIP. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: TOK-1β Anticuerpo (B-10): sc-271985
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) TOK-1 | sc-406452-NIC | 20 µg | $410.00 |
BCCIP (proteína que interactúa con BRCA2 y CDKN1A) codifica un factor conservado que favorece la estabilidad del genoma mediante interacciones con BRCA2 y p21/CDKN1A, conectando la reparación del ADN con el control del ciclo celular. BCCIP contribuye a la recombinación homóloga, a las respuestas al estrés replicativo y a la señalización de puntos de control, y se ha implicado en la preservación de la integridad cromosómica durante la fase S. La alteración de la expresión o la función de BCCIP se ha asociado con respuestas defectuosas al daño del ADN y con un aumento de la inestabilidad genómica, características observadas con frecuencia en la biología del cáncer. Como resultado, BCCIP es una diana útil para diseccionar las vías de reparación del ADN, el control de la proliferación y los mecanismos que acoplan la replicación con la activación de los puntos de control en células humanas.
TOK-1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus BCCIP en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de BCCIP. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de BCCIP. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con BCCIP alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.