Partículas Lentivirales de Activación (h) TNIK: sc-401523-LAC
- Especies Diana: human
- 200 µl de Partículas Lentivirales de Activación CRISPR/dCas listas para usar
- Partículas Lentivirales de Acitvación (h) TNIK es un sistema de activación de la trascripción por mediante una activación sinérgica (SAM), diseñado para incrementar la expresión de un gen determinado a través de la tranducción lentiviral de las células
- Partículas Lentivirales de Acitvación (h) TNIK incluyen los siguientes elementos activadores SAM: plásmido codificador de la nucleasa Cas 9 desactivada, (D10A y N863A) fusionadas al dominio de transactivación VP64; plásmido codificador de la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 y un plásmido que codifica la secuencia de diana específica de 20 nt de ARN. También contienen genes de resistencia a blasticidina, higromicina y puromicina.
- El complejo SAM resultante se une en un punto específico a unos 200 -250 nt aguas arriba del inicio de la transcripción del gen diana y ofrece un potente punto de reclutamiento de factores de transcripción para un eficiente incremento de la activación génica
- Los gRNA codificados por el TNIK Plásmido de activación lentiviral (h) y el TNIK Plásmido de activación lentiviral (h2) se dirigen a regiones reguladoras distintas del promotor TNIK. Puede que haya uno o ambos diseños disponibles
- Tras la transfección, la eficacia de la activación génica puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: TNIK Anticuerpo (C-1): sc-377215
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Partículas Lentivirales de Activación (h) TNIK | sc-401523-LAC | 200 µl | $455.00 |
La TNIK (quinasa que interactúa con TRAF2 y NCK) humana es una quinasa de serina/treonina que integra señales procedentes de pequeñas GTPasas y proteínas adaptadoras para regular la dinámica del citoesqueleto, el tráfico vesicular y los programas transcripcionales. TNIK desempeña funciones bien descritas en la señalización Wnt/β-catenina, incluida la modulación de la transcripción dependiente de TCF/LEF, y contribuye a vías que gobiernan la polaridad celular, la migración y el desarrollo neuronal. En contextos inmunitarios y epiteliales, TNIK puede cruzarse con redes de señalización de estrés e inflamación mediante interacciones proteína–proteína y su actividad quinasa. La desregulación de la expresión o de la señalización de TNIK se ha asociado con estados oncogénicos de la vía Wnt y con fenotipos del neurodesarrollo, lo que la convierte en un nodo útil para estudios mecanísticos del control de vías y del comportamiento celular.
Las partículas de activación lentiviral TNIK (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de TNIK en una gama más amplia de tipos de células humanas.
Las partículas de activación lentiviral TNIK (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción TNIK, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de TNIK. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo TNIK y la arquitectura reguladora.
El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.