TNFα-IP 1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423434

Descripción general

Tnfaip1 (TNFα-IP 1) codifica una proteína inducible por TNFα implicada en la señalización sensible al estrés y en la homeostasis celular. Entre las funciones descritas se incluyen roles en procesos nucleares y citoplasmáticos que influyen en la progresión del ciclo celular, las respuestas al daño del ADN y el recambio de proteínas, vinculando señales inflamatorias asociadas a TNF/NF-κB con programas transcripcionales y de supervivencia aguas abajo. En sistemas murinos, TNFα-IP 1 se estudia por su contribución a la regulación dependiente del contexto de la proliferación y la apoptosis, procesos que moldean la remodelación tisular y los microambientes inmunitarios. La desregulación de estas vías se examina con frecuencia en modelos de biología de enfermedades inflamatorias y de señalización asociada a tumores, sin que ello implique resultados clínicos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TNFα-IP 1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Tnfaip1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Tnfaip1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Tnfaip1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TNFα-IP 1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Tnfaip1 para la investigación de la señalización de TNFα-IP 1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Tnfaip1 críticos para la función de TNFα-IP 1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Tnfaip1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TNFα-IP 1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido TNFα-IP 1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Tnfaip1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TNFα-IP 1 (m) y el plásmido HDR TNFα-IP 1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Tnfaip1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Tnfaip1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.