TMPRSS11E Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-412014

Descripción general

TMPRSS11E codifica una proteasa serina transmembrana de tipo II expresada en superficies epiteliales, donde la proteólisis pericelular puede regular la función de la barrera mucosa, las interacciones célula–célula y la remodelación del microambiente extracelular. Como parte de la familia TTSP, TMPRSS11E está en posición de influir en la señalización activada por proteasas y en eventos de procesamiento proteolítico que moldean la diferenciación epitelial y las respuestas inflamatorias. La actividad desregulada de proteasas epiteliales se ha asociado con la patobiología de las vías respiratorias y de los epitelios escamosos, lo que convierte a TMPRSS11E en una diana relevante para estudiar los mecanismos subyacentes a las respuestas al estrés epitelial y la remodelación tisular. Su arquitectura de proteasa anclada a la membrana facilita la investigación de redes de proteasas compartimentalizadas en la superficie celular y su impacto en programas de señalización posteriores.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TMPRSS11E (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TMPRSS11E en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TMPRSS11E junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TMPRSS11E tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TMPRSS11E.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TMPRSS11E para la investigación de la señalización de TMPRSS11E, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de TMPRSS11E críticos para la función de TMPRSS11E
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TMPRSS11E para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TMPRSS11E CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido TMPRSS11E CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TMPRSS11E. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TMPRSS11E (h) y el plásmido HDR TMPRSS11E (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TMPRSS11E para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TMPRSS11E definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.