Plasmide Double Nickase (h) TMEM98: sc-409870-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) TMEM98 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TMEM98 Double Nickase (h) et le plasmide TMEM98 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TMEM98. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) TMEM98 | sc-409870-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) TMEM98 | sc-409870-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TMEM98 code une petite protéine transmembranaire enrichie dans les tissus oculaires et impliquée dans la régulation de l’organisation de la matrice extracellulaire ainsi que dans la signalisation intercellulaire aux interfaces épithéliales et gliales. Des études génétiques chez l’humain associent TMEM98 à des phénotypes oculaires héréditaires, notamment la nanophthalmie et des anomalies apparentées du segment antérieur, soulignant sa pertinence pour les voies qui gouvernent la croissance oculaire et l’homéostasie tissulaire. Au niveau cellulaire, TMEM98 est liée à des processus localisés à la membrane qui influencent le dialogue entre voies de signalisation et le maintien structural, ce qui en fait une cible utile pour analyser comment les protéines membranaires modulent des programmes de développement et de réponse au stress. La perturbation expérimentale de TMEM98 soutient l’étude des relations génotype–phénotype dans le développement de l’œil et dans des modèles cellulaires pertinents pour la maladie.
TMEM98 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TMEM98 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TMEM98. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TMEM98. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TMEM98.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.