TMEM88 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405789

Descripción general

TMEM88 codifica una pequeña proteína transmembrana implicada en la regulación de la señalización Wnt al modular la transducción de señales dependiente de Dishevelled, lo que influye en programas de transcripción impulsados por β-catenina. A través de sus efectos sobre la salida de la vía, TMEM88 puede moldear procesos celulares como la proliferación, la diferenciación, la polaridad y la dinámica epitelio-mesenquimal. La alteración de la expresión de TMEM88 o del contexto de la vía se ha asociado con una actividad Wnt desregulada en múltiples escenarios relevantes para la enfermedad, incluidos el cáncer y la remodelación tisular. En sistemas modelo humanos, la perturbación de TMEM88 se utiliza para investigar puntos de control proximales a la membrana que ajustan la amplitud de la vía Wnt y las redes de expresión génica aguas abajo.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TMEM88 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TMEM88 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TMEM88 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TMEM88 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TMEM88.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TMEM88 para la investigación de la señalización de TMEM88, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de TMEM88 críticos para la función de TMEM88
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TMEM88 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TMEM88 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido TMEM88 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TMEM88. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TMEM88 (h) y el plásmido HDR TMEM88 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TMEM88 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TMEM88 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.