TMEM53 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-413194

Descripción general

TMEM53 (proteína transmembrana 53) codifica una pequeña proteína asociada a membrana implicada en la regulación de la señalización vinculada a la envoltura nuclear y la homeostasis celular. Estudios recientes relacionan TMEM53 con vías que regulan la señalización BMP/SMAD y el control transcripcional, lo que sugiere funciones en la coordinación de la transducción de señales intracelulares con respuestas nucleares. La alteración de la función de TMEM53 se ha asociado con perturbaciones del desarrollo esquelético y craneofacial y con fenotipos óseos relacionados, por lo que resulta de interés para estudios mecanísticos de diferenciación osteogénica y biología del desarrollo. Su expresión y su presunta localización en membrana también respaldan su investigación en el contexto de la comunicación entre orgánulos, el tráfico proteico y la modulación de vías dependiente del contexto.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TMEM53 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TMEM53 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TMEM53 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TMEM53 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TMEM53.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TMEM53 para la investigación de la señalización de TMEM53, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de TMEM53 críticos para la función de TMEM53
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TMEM53 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TMEM53 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido TMEM53 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TMEM53. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TMEM53 (h) y el plásmido HDR TMEM53 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TMEM53 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TMEM53 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.