TMEM132C Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-431553

Descripción general

Tmem132c codifica TMEM132C, una proteína transmembrana multipaso predicha que se localiza en las membranas celulares y se cree que contribuye a la organización de la superficie celular y a la señalización asociada a la membrana. Los miembros de la familia TMEM132 se han vinculado con la regulación de la adhesión celular y la dinámica del citoesqueleto, lo que sugiere funciones en la arquitectura tisular y en la homeostasis neuronal o epitelial. En sistemas de ratón, los patrones de expresión de Tmem132c respaldan la investigación de cómo las proteínas de membrana modulan la conectividad celular y las respuestas al estrés durante el desarrollo y en la fisiología del adulto. La desregulación de módulos transmembrana de adhesión/señalización se explora con frecuencia en estudios de neurobiología y de genética de enfermedades complejas, lo que convierte a TMEM132C en una diana útil para el análisis mecanístico de vías.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TMEM132C (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Tmem132c en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Tmem132c junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Tmem132c tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TMEM132C.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Tmem132c para la investigación de la señalización de TMEM132C, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Tmem132c críticos para la función de TMEM132C
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Tmem132c para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TMEM132C CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido TMEM132C CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Tmem132c. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TMEM132C (m) y el plásmido HDR TMEM132C (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Tmem132c para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Tmem132c definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.