TMEM126A Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406768

Descripción general

TMEM126A codifica una proteína transmembrana asociada a la mitocondria implicada en la biología de la cadena respiratoria y en el mantenimiento de la capacidad de fosforilación oxidativa. Los estudios vinculan TMEM126A con procesos relacionados con el complejo I mitocondrial, influyendo en el equilibrio redox celular, la producción de ATP y la sensibilidad al estrés metabólico. La alteración de la función de TMEM126A se ha asociado con fenotipos de disfunción mitocondrial, incluidas manifestaciones neurooftálmicas como la atrofia óptica autosómica recesiva, lo que la hace relevante para investigar la vulnerabilidad bioenergética en células humanas. Por ello, TMEM126A es una diana útil para explorar el control de calidad mitocondrial, la señalización adaptativa al estrés y las consecuencias posteriores sobre la supervivencia celular y los programas de diferenciación.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TMEM126A (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TMEM126A en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TMEM126A junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TMEM126A tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TMEM126A.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TMEM126A para la investigación de la señalización de TMEM126A, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de TMEM126A críticos para la función de TMEM126A
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TMEM126A para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TMEM126A CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido TMEM126A CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TMEM126A. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TMEM126A (h) y el plásmido HDR TMEM126A (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TMEM126A para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TMEM126A definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.