Plasmide CRISPR/Cas9 KO TLR8 (m): sc-431303
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- TLR8 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique TLR8, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: TLR8 Antibody (D-8): sc-373760
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO TLR8 (m) | sc-431303 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Tlr8 code le récepteur Toll‑like 8 (TLR8), un récepteur endosomal de reconnaissance des motifs (PRR) qui détecte l’ARN simple brin d’origine pathogène ainsi que certains agonistes synthétiques, afin d’initier la signalisation de l’immunité innée. Après activation, TLR8 déclenche des cascades dépendantes de MYD88 qui convergent vers les voies NF‑κB et MAPK, favorisant des programmes transcriptionnels de cytokines inflammatoires et de médiateurs co‑stimulatoires qui orientent les réponses myéloïdes et lymphoïdes. Chez la souris, TLR8 contribue à la régulation de l’équilibre des cytokines et à la communication croisée entre les récepteurs endosomaux de détection des acides nucléiques, influençant la présentation de l’antigène et, en aval, l’immunité adaptative. Une signalisation liée à TLR8 dérégulée a été associée à des phénotypes inflammatoires et à une défense de l’hôte altérée, ce qui en fait une cible pertinente pour l’étude de la biologie des infections, des mécanismes de l’auto‑immunité et du stress immunométabolique.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO TLR8 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Tlr8 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Tlr8, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Tlr8 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine TLR8.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Tlr8 pour l'étude de la signalisation de TLR8, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Tlr8 essentiels à la fonction de TLR8
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Tlr8 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le TLR8 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le TLR8 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Tlr8. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le TLR8 plasmide HDR (m) et le TLR8 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Tlr8 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Tlr8 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.