Plásmido Doble Nickase (m) TLR3: sc-431258-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)TLR3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa TLR3 (m) y el plásmido de doble nickasa TLR3 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Tlr3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) TLR3 | sc-431258-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) TLR3 | sc-431258-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Tlr3 codifica el receptor tipo Toll 3 (TLR3), un receptor endosomal de reconocimiento de patrones que detecta ARN de doble cadena producido durante la replicación viral o liberado por células dañadas. Tras la unión del ligando, TLR3 señaliza predominantemente a través del adaptador TRIF para activar las vías de IRF3/IRF7 y NF-κB, impulsando la producción de interferón de tipo I y programas de citocinas inflamatorias. Este receptor contribuye a la detección inmunitaria innata, la maduración de las células dendríticas y la regulación de las respuestas antivirales, a la vez que se cruza con vías que controlan la apoptosis y la autofagia. La actividad alterada de TLR3 se ha vinculado con variaciones en la susceptibilidad a la infección viral y con una inflamación desregulada relevante para fenotipos neuroinflamatorios y de tipo autoinmune en modelos murinos.
TLR3 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Tlr3 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Tlr3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Tlr3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Tlr3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.