Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Plásmido Doble Nickase (h) TLR2: sc-400267-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)TLR2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa TLR2 (h) y el plásmido de doble nickasa TLR2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a TLR2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: TLR2 Anticuerpo (TL2.1): sc-21759
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) TLR2 | sc-400267-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) TLR2 | sc-400267-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TLR2 codifica el receptor tipo Toll 2 (Toll-like receptor 2), un receptor de reconocimiento de patrones localizado en la membrana plasmática que detecta lipoproteínas bacterianas y otros ligandos microbianos, a menudo mediante la heterodimerización con TLR1 o TLR6. Tras su activación, TLR2 transmite señales a través de vías dependientes de MYD88 y TIRAP para inducir las cascadas de NF-κB y MAPK, impulsando la transcripción de citocinas y quimiocinas proinflamatorias y modulando la comunicación entre la inmunidad innata y la adaptativa. La actividad de TLR2 también se integra con programas de fagocitosis, autofagia e inflamasoma, influyendo en las respuestas antimicrobianas y en la homeostasis tisular. La desregulación de la señalización de TLR2 se ha implicado en estados inflamatorios crónicos y en patología asociada a infecciones, por lo que constituye un nodo ampliamente estudiado en la investigación de las interacciones huésped–microbio y de la inflamación estéril.
TLR2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus TLR2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de TLR2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de TLR2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con TLR2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.