Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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TLR1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m2): sc-423418-KO-2
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- TLR1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m2) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico TLR1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: TLR1 Anticuerpo (H-8): sc-514399
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
TLR1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m2) | sc-423418-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Tlr1 codifica el receptor tipo Toll 1 (TLR1) del ratón, un receptor de reconocimiento de patrones que forma un heterodímero funcional con TLR2 para detectar lipopeptidos bacterianos triacilados en la superficie celular. La unión del ligando desencadena señalización dependiente de MyD88 y la activación de las cascadas de NF-κB y MAPK, promoviendo la transcripción de citocinas y quimiocinas proinflamatorias que moldean la inmunidad innata y las respuestas adaptativas posteriores. La actividad de TLR1 influye en la activación de células dendríticas y macrófagos, la inmunidad de barrera y la comunicación con productos microbianos dentro del microbioma. La desregulación de la señalización TLR1/TLR2 se ha asociado con fenotipos inflamatorios y con una defensa del huésped alterada en modelos de infección y de enfermedades inmunomediadas.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO TLR1 (m2) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Tlr1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Tlr1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Tlr1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TLR1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Tlr1 para la investigación de la señalización de TLR1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Tlr1 críticos para la función de TLR1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Tlr1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido TLR1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido TLR1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Tlr1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TLR1 (m) y el plásmido HDR TLR1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Tlr1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Tlr1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.