TLE3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423414

Descripción general

Tle3 codifica el correpresor transcripcional TLE3, miembro de la familia Groucho/TLE, que modula la expresión génica al asociarse con factores de transcripción específicos de secuencia y reclutar complejos reguladores de la cromatina. TLE3 participa en programas del desarrollo y de determinación de linaje, con funciones destacadas en redes transcripcionales relacionadas con Wnt/β-catenina y Notch, donde puede influir en decisiones de destino celular y trayectorias de diferenciación. En sistemas murinos, se ha implicado a TLE3 en la biología de los adipocitos y en la regulación de genes metabólicos, así como en un control más amplio de la proliferación y la diferenciación mediante represión dependiente del contexto. Los programas transcripcionales asociados a TLE3 desregulados se estudian con frecuencia en modelos de cáncer y de trastornos del desarrollo para comprender cómo la alteración de la función del correpresor reconfigura las salidas de señalización.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TLE3 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Tle3 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Tle3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Tle3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TLE3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Tle3 para la investigación de la señalización de TLE3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Tle3 críticos para la función de TLE3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Tle3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TLE3 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido TLE3 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Tle3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TLE3 (m) y el plásmido HDR TLE3 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Tle3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Tle3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.