Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
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TLE2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423413
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- TLE2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico TLE2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: TLE2 Anticuerpo (D-10): sc-374226
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
TLE2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423413 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Tle2 codifica el correpresor transcripcional TLE2, una proteína de la familia Groucho/TLE que sirve de andamiaje para complejos de cromatina represivos y modula programas de expresión génica dependientes del contexto durante el desarrollo y la homeostasis tisular. TLE2 interactúa con factores de transcripción específicos de secuencia e integra señales de vías como Wnt/β-catenina y Notch, influyendo en las decisiones de destino celular, la diferenciación y el mantenimiento de células madre/progenitoras. En modelos murinos y sistemas celulares, una actividad alterada de TLE2 puede perturbar la especificación de linajes y el control proliferativo, lo que lo hace relevante para estudiar los mecanismos que subyacen a redes transcripcionales desreguladas en trastornos del desarrollo y en vías asociadas al cáncer. Sus funciones nucleares como correpresor también lo sitúan como un nodo útil para analizar la regulación epigenética y la dinámica de la represión transcripcional.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO TLE2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Tle2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Tle2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Tle2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TLE2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Tle2 para la investigación de la señalización de TLE2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Tle2 críticos para la función de TLE2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Tle2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido TLE2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido TLE2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Tle2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TLE2 (m) y el plásmido HDR TLE2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Tle2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Tle2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.