Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) TIP120A: sc-402506-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)TIP120A consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa TIP120A (h) y el plásmido de doble nickasa TIP120A (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CAND1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: TIP120A Anticuerpo (G-3): sc-137055
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) TIP120A | sc-402506-NIC | 20 µg | $410.00 |
CAND1 (TIP120A) codifica un regulador de las ligasas de ubiquitina tipo cullina-RING que se une a cullinas no neddiladas y promueve el intercambio de módulos receptores de sustrato, controlando así el ensamblaje y la remodelación de las CRL. A través de esta actividad, TIP120A coordina la proteostasis dependiente de ubiquitina e influye en la progresión del ciclo celular, las respuestas al estrés de replicación del ADN y la degradación dependiente de señales de proteínas reguladoras clave. La desregulación de la dinámica de las CRL y del equilibrio de neddilación/desneddilación se ha vinculado con inestabilidad genómica y alteraciones del control del crecimiento, lo que convierte a CAND1 en un nodo relevante en vías que con frecuencia se ven perturbadas en la biología del cáncer. La función de TIP120A también se estudia en el contexto del control de calidad dependiente del proteasoma y de la adaptación al estrés, donde la selección de sustratos por las CRL moldea los fenotipos celulares.
TIP120A El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CAND1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CAND1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CAND1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CAND1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.